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4S Red Plus核酸染色剂是一种独特的油性大分子物质，其分子量约为1,000左右，能与DNA静电结合。相对于EB，4S Red Plus不能透过细胞膜而进入细胞内。Ames测试法显示，该染色剂的诱变性远远小于EB。4S Red Plus在300nm紫外光附近可获得很好的激发，可用和观察EB染色相同的普通紫外凝胶透射仪观察。

• 无毒性：无法穿透细胞膜而进入细胞。
  
• 高灵敏性：灵敏度高，对核酸的迁移影响小于SYBR Green I。
  
• 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
  
• 操作简单：无需脱色或冲洗。
  
• 适用性强：可选择凝胶染色法和泡染法；适用于琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶电泳；可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。
  
• 使用方便：与EB的使用方法相似，无需更换Buffer及检测设备。
  
• 经济：单次成本比银染和SYBR Green I低。

• 凝胶染色法(胶染法/前染色)
  
  • 制备100mL琼脂糖溶液，加热(微波炉)溶解后使温度降至60～70℃；
    
  • 加入10μL 4S Red Plus核酸染色剂(10000×)；
    
  • 摇晃、震荡或翻转保证染色剂充分混合，铺胶；
    
  • 电泳并用紫外投射仪观察结果。
    
    • 由于4S Red Plus具有良好的热稳定性，故也可在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却。
      
    • 如果总看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关。请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。
      
    • 此方法不适合预制丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
• 泡染法
  
  • 常规方法电泳
    
  • 制备3X染色液：用水将染色剂稀释3,300倍到0.1M NaCl中(。例如：将15μL 4S Red Plus和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)
    
  • 将3X染色液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染色剂避光。室温振荡染色30min，染色时间因凝胶浓度和厚度而定，对于含3.5～10%丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30min到1h，并随丙烯酰胺含量增加而延长。
    
    • 用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
      
    • 3×染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。